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elisa試劑盒白介素類的主要試劑的原料和制備方法
更新時間:2018-06-19   點擊次數:1045次

elisa試劑盒白介素類的主要試劑為固相的抗原或抗體、酶標記的抗原或抗體和與標記酶直接關聯(lián)的酶反應底物。以下敘述這些試劑的原料和制備方法。

 固相的抗原或抗體稱為免疫吸附劑。將抗原或抗體固相化的過程稱為包被(coating)。由于載體的不同,包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板為載體,通常將抗原或抗體溶于緩沖液(zui常用的為pH9.6的碳酸緩沖液)中,加于ELISA板孔中在4℃過夜,經清洗后即可應用。如果包被液中的蛋白質濃度過低,固相載體表面有能被此蛋白質*覆蓋,其后加入的血清標本和酶結合物中的蛋白質也會部分地吸附于固相載體表面,zui后產生非特異性顯色而導致本底偏高。在這種情況下,如在包被后再用1%~5%牛血清白蛋白包被一次,可以消除這種干擾。這一過程稱為封閉(blocking)。包被好的ELISA板在低溫可放置一段時間而不失去其免疫活性醫(yī)`學教育網搜集整理。

    ELISA中所用的酶要求純度高、催化反應的轉化率高、專一性強、性質穩(wěn)定、來源豐富、價格不貴、制備成的酶標抗體或抗原性質穩(wěn)定,繼續(xù)保留著它的活性部分和催化能力。在受檢標本中不存在與標記酶相同的酶。另外它的相應底物應易于制備和保存,價格低廉,有色產物易于測定,光吸收高。elisa試劑盒白介素類中常用的酶為辣根過氧化酶(HRP)和從牛腸粘膜或大腸桿菌提取的堿性磷酸酶。

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