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小鼠大內(nèi)皮素 ELISA試劑盒操作步驟
更新時間:2022-11-14   點擊次數(shù):886次

小鼠大內(nèi)皮素 ELISA試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

電壓門控鉀通道蛋白1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCNAB1

微管驅(qū)動蛋白家族成員1A抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KIF1A

鉀離子通道蛋白家族成員1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCNE1

鉀離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCNE1L

鉀離子通道蛋白家族成員2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCNE2

G蛋白激活內(nèi)向鉀通道5抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCNJ5

鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCTD12

抑癌蛋白EZH2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KMT6

DNA修復(fù)酶Ku70抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Ku-70

DNA修復(fù)酶Ku-80抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Ku-80

14號染色體開放閱讀框106抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:C14orf106

腦蛋白9抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KNDC1

鉀通道相互作用蛋白2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KChIP2

劍蛋白p60亞基A1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Katanin p60 A1

Kazrin蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Kazrin

鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KCTD8

磷酸化Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Phospho-KSR1 

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